Резюме: В данной статье описаны показания, материалы и методы, техника сквозной и послойной кератопластики с применением лиофилизированной донорской роговицы, осложнения и результат данной операции в ветеринарной офтальмологии.
Ключевые слова: лиофилизированная донорская роговица, язва роговицы, сквозная и послойная кератопластика.
Technique corneal transplant surgery with the use of freeze-dried donor transplant in small animals
Pavlova Tatyana Nikolaevna
The resume: In given article indications, materials and methods, technics of a through and level-by-level keratoplasty with application a donor cornea, complication and result of the given operation in veterinary ophthalmology are described.
Key words: freeze-dried donor cornea, a helcoma, a through and level-by-level keratoplasty.
Повреждения и заболевания роговицы занимают одно из ведущих мест в ветеринарной офтальмологии. В таких экстренных ситуациях, как проникающие ранения глаза с дефицитом ткани роговицы, ожоги глазного яблока, язвы роговицы, осложненные десцеметоцеле и перфорации ее при инфекционных, трофических, аллергических и других кератитах, необходимо ургентное хирургическое вмешательство на роговой оболочке.[1] Основной целью лечебной кератопластики (ЛКП) является сохранение глазного яблока путём удаления патологического участка роговицы и замещения её дефекта. Ранее с целью коррекции дефектов роговицы применялись различные материалы : конъюнктивальный лоскут «на ножке», аллоплант проф. Мулдашева (г. Уфа), биотрансплантат компании «Cook» (Австралия). [5,6] Все они имеют как выраженные достоинства, так и существенные недостатки.
Рис.1 Конъюнктивальный лоскут «на ножке»
Рис.2 Аллоплант проф. Э. Р. Мулдашева
Рис.3 Биотрансплантат компании «Cook»
Целью работы являлся поиск материала, наиболее полно отвечающего следующим требованиям:
- возможностью применения при сквозной и послойной кератопластике;
- высокой степенью приживляемости;
- доступностью и простотой методов использования.
Наиболее полно этим требованиям отвечает донорская роговица. Следует отметить, что роговица является исключением среди других тканей, подлежащих трансплантации. Она не имеет собственных сосудов и отделена от сосудистого тракта глаза, чем и объясняется относительная иммунная обособленность роговицы, позволяющая успешно выполнять кератопластику без строгого подбора донора и реципиента.
Задачами работы было:
- подобрать наиболее доступный способ консервации донорской роговицы для собак и кошек;
- разработать технические этапы сквозной и послойной кератопластики;
- оценить результаты хирургического лечения, интра- и послеоперационные осложнения.
В гуманитарной медицине пересадка донорской роговицы имеет широкое распространение при ургентных операциях, целью которых является сохранения глазного яблока (первая успешная пересадка была произведена в 1906 гЭвальдомЦирном ) [4] В ветеринарной офтальмологии на базе «Центра ветеринарной офтальмологии доктора Шилкина А. Г.» г. Москвы, впервые стали использовать консервированный донорский материал для трансплантации. В нашей стране на сегодняшний день не разработаны и не описаны сведения о показаниях, технике операции, клинических результатах и характере осложнений при данном методе. В связи с чем и было проведено данное исследование.
Материалы и методы. Донорский материал получали от животных (кошки, собаки) павших вследствие травм или усыпленных по желанию владельца. У животных – доноров материала отсутствовали клинические проявления инфекционных, онкологических и системных заболеваний. Мной было изучено большое количество методов консервации донорской роговицы (способ Филатова В. П. влажная камера с умеренной гипотермией – температура +2- +4С, различные жидкости, маслянистые вещества, консервация с помощью мёда, формалина, замораживание тканей и т.д.), однако каждый из этих методов имел существенные недостатки, такие как дороговизна, трудоемкость, а также короткий срок хранения. Выбрали наиболее доступный для практического использования метод - обезвоживания донорских тканей в присутствии силикагеля на основе двуокиси кремния. Данный метод консервации обладает относительной простотой и доступностью, и что самое главное позволяет хранить консервированный материал длительное время (до 6 месяцев). К сожалению, недостатком этого метода является гибель эндотелиального слоя роговицы в процессе высушивания, что снижает оптическую прозрачность трансплантата при выполнении сквозных пересадок.[7]
За 2 года было прооперированно 45 животных из них 35собак ( 2 собаки с бинокулярной патологией) и 10 кошек (1 кошка с бинокулярной патологией), в возрасте от 3 месяцев до 10 лет. Показаниями к трансплантации донорской роговицы послужили 1.перфорирующие и не перфорирующие септические язвы роговицы, 2. скальпированные травмы с потерей более 50% роговицы, 3. тотальные и субтотальные корнеальные секвестры с поражением всех слоев роговицы, включая эндотелий.
Рис.4 Септическая язва роговицы
Рис.5 Язва роговицы, осложненная десцеметоцеле
Рис.6 Перфорация роговицы
Рис.7 Субтотальный корнеальный секвестр
Комплексное предоперационное офтальмологическое обследование
осуществлялось методом биомикроскопии с помощью налобного бинокулярного микроскопа и щелевой лампы «SHIN-NIPPON». Локализация травматического дефекта проводилась с использованием раствора флюоресцина и последующим исследованием в ультрафиолетовом освещении щелевой лампы. Внутриглазное давление измеряли с помощью тонометра Маклакова. Секрецию слезной жидкости оценивали пробой Ширмера. Проводили УЗИ глазного яблока. Выполнялось комплексное предоперационное обследование животного, включающее биохимический и общий клинический анализ крови, рентген грудной клетки, ЭКГ и УЗИ сердца, для выявления степени анестезиологического риска. При выборе трансплантата учитывалась видовая принадлежность донорской роговицы и реципиента.
Техника операции зависела от глубины и тяжестью поражения роговицы. При глубоких язвах и десцеметоцеле проводили послойную кератопластику, при перфорациях роговицы - сквозную кератопластику. Основные моменты операции сквозной кератопластики осуществлялись по общепринятой медицинской методике, описанной Дроновым М. М. (1997 г.) [3,4] и адаптированной для использования в ветеринарной офтальмологии мелких домашних животных Шилкиным А.Г. в 2004 году. [9]
Операция проводилась под общей анестезией со стандартной обработкой операционного поля. Для расширения глазной щели латеральной кантотомии не проводили, использовали векорасширитель. Наилучшие результаты наблюдали при применении векорасширителяMcNeill-Oldman, который выполнял функции как расширителя так и фиксатора глазного яблока. Акинезия глазного яблока достигалась также путем наложения на конъюнктиву фиксирующих лигатур. Лиофилизированную донорскую роговицу регидратировали в растворе 1% гентамицина и 0,9% физиологическом растворе в соотношении 1:5, сроком до 30 минут. Регидротация более 30 минут ведет к набуханию донорской роговицы, что делает материал не пригодным для трансплантации. Планируемую зону трансплантации ограничивали трепаном. Трепан подбирали таким образом, что бы охватить всю область пораженных тканей. Далее некротизированные ткани роговицы иссекали алмазным микролезвием и лейкосапфировым ножом расслаивателем, с применением техники суперфициальнойкератэктомии. В случае остаточной инфильтрации поэтапно удалялись более глубокие ее слои.[8] . При проведении сквозной кератопластики при необходимости дополнительно проводили рассечение синехий, освобождали зрачковую диафрагму, удаляли гнойно-фибринозные сгустки из передней камеры. Из донорской роговицы трепаном соответствующего диаметра на специальной стерильной подложке из медицинского каучука выкраивали трансплантат. Такая техника позволяет добиться точного соприкосновения собственной роговицы с донорским трансплантатом. В некоторых случаях, когда необходим трансплантат нестандартной формы, для его выкраивания используют алмазный микронож и микрохирургические ножницы. [2] Для фиксации применяли одиночные, узловатые, роговичные швы, использовали шовный материал - Prolen 8/0,9/0. Иглу проводили на расстоянии 1 мм от краев раны, через толщу роговицы не захватывая внутренний эндотелиальный слой. Вначале накладывали швы в позиции на«12-3-6-9 часах». После фиксации трансплантата швы накладывали с интервалом 1-1,5 мм в соответствующие меридианы роговицы. Операцию заканчивали субконъюнктивальным введением гентамицина 1%. [8]. В течение 4-х недель животные находились в защитных воротниках. Послеоперационный уход включал системное и местное применение антимикробных средств, инстилляции НПВС, кератопротекторов и мидриатиков. Роговичные швы снимали через 21-35 дней.
Рис.8 Подготовка операционного поля
Рис.9 Ограничение зоны трансплантации трепаном
Рис.10 Иссекаем алмазным микролезвием
Рис.11 Удаление поврежденной роговицы
Рис.12 Накладываем донорскую роговицу
Рис.13 Фиксируем одиночными швами
Анализ клинических результатов показал сохранение прозрачности в области дефекта у 20% животных с небольшим диаметром трансплантата (менее 8мм) при передней послойной кератопластике. Помутнение трансплантата различной степени интенсивности наблюдали у 80% животных после проведения сквозных кератопластик, носящих органосохраняющий характер.
Общее количество осложнений, включающие интраоперационные и послеоперационные при сроке наблюдения до двух лет, в проведенных нами клинических исследованиях составило 15%. Интраоперационные перфорации десцеметоцеле (n=2 - 4%) корректировались сопоставлением краев дефекта десцеметовой мембраны с последующей фиксацией донорской роговицы или проведением сквозной кератопластики в условиях гипотонии. Постоперационные осложнения (n=5 - 11%): «болезнь трансплантата» (отмечалась с 7-го дня) являлась следствием ответа иммунной системы организма на чужеродную ткань. Проявлялось данное осложнение стойкой и интенсивной гиперемией конъюнктивы, помутнением донорской роговицы, дислокацией и отеком трансплантата, отторжения швов при сквозных кератопластиках (собаки n= 3 - 7 % ). Постоперационный панофтальмит наблюдали на 10 день (кошка n =1 - 2%), образование вторичной глаукомы после 21дня от операции (собака n =1 - 2 %). Большое количество осложнений можно объяснить тяжестью патологии, отсутствием данных по иммунологической совместимости лиофилизированной роговицы у животных, поздними сроками обращения владельцев животных за специализированной помощью. За последний год мы отметили снижение количества поcтоперационных осложнений трансплантации донорской роговицы на 5 %.
После проведенных операций у 85% животных удалось сохранить глаз как орган. У 20% животных удалось сохранить не только глаз, но и его частично оптические функции. Из недостатков метода можно отметить встречающееся непрозрачное приживление донорской роговицы.
Рис.14 Сквозная кератопластика через 3 месяца
Рис.15 Послойная субтотальная кератопластика через 3 месяца
Рис.16 Послойная кератопластика через 3 месяца
Лиофилизированный донорский трансплантат, целесообразно применять при сквозной и передней послойной кератопластике. Его эффективно использовать при замещении дефектов любой величины вплоть до тотальных. Отметила высокую степень приживляемости и значительную межпородную совместимость лиофилизированного донорского трансплантата. Простота и доступность получения донорской лиофилизированной роговицы позволяет рекомендовать её использование в практике ветеринарной офтальмологии.
